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以人體胎盤提取液皮內反應進行癌癥普查的研究

  • 分類:行業新聞
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  • 發布時間:2019-04-29 13:08
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【概要描述】以人體胎盤提取液皮內反應進行癌癥普查的研究中國預防醫科院流行病學徽生物學研究所張見麟中國科學院武漢病毒研究所黃文林湖北省沙市第一人民醫院黃鳳翥  1962年松原正香發現人體胎盤與癌組織在生物學方面有相似之處,他以人體胎盤代替癌組織提取了抗原,對病人進行皮試,發現與尚未轉移的早期癌的陽性率可高達94,5%。因此,日本全國癌癥中心自1972年起已釆用此法進行癌癥普查,國內一些單位也進行了某些報道,但至

以人體胎盤提取液皮內反應進行癌癥普查的研究

【概要描述】以人體胎盤提取液皮內反應進行癌癥普查的研究中國預防醫科院流行病學徽生物學研究所張見麟中國科學院武漢病毒研究所黃文林湖北省沙市第一人民醫院黃鳳翥  1962年松原正香發現人體胎盤與癌組織在生物學方面有相似之處,他以人體胎盤代替癌組織提取了抗原,對病人進行皮試,發現與尚未轉移的早期癌的陽性率可高達94,5%。因此,日本全國癌癥中心自1972年起已釆用此法進行癌癥普查,國內一些單位也進行了某些報道,但至

  • 分類:行業新聞
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  • 來源:
  • 發布時間:2019-04-29 13:08
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以人體胎盤提取液皮內反應進行癌癥普查的研究

中國預防醫科院流行病學徽生物學研究所 張見麟

中國科學院武漢病毒研究所 黃文林

湖北省沙市第一人民醫院 黃鳳翥

  1962年松原正香發現人體胎盤與癌組織在生物學方面有相似之處,他以人體胎盤代替癌組織提取了抗原,對病人進行皮試,發現與尚未轉移的早期癌的陽性率可高達94,5%。因此,日本全國癌癥中心自1972年起已釆用此法進行癌癥普查,國內一些單位也進行了某些報道,但至今尚未推廣,究其原因,一則病例較少,同時還存在一些技術上難以推廣的問題,如其安全性特別是乙肝抗原攜帶問顥,每次制品效價測定需在健康人身上進行,以及保存期等等。我們研究并解決了這些問題,為推廣此法打下了基礎,現報告如下。

  1、材料與方法

  1.1人體胎盤提取液的制備:取新鮮健康足月順產第一胎產婦的人體胎盤,毎個胎盤血清事先均以放射免疫方法檢査其是否擁帶乙肝表面抗原,只有HBsAg陰性者才能采用。將胎盤剪去羊腆及血管,切成小塊,邊沖洗邊擠壓,直入3倍量無水乙醇,混勻置40C冰箱過夜。次日用濾紙過濾,濾后沉渣連同濾紙一起置40C冰箱中陰干,剝下稱重,加入0.4%的酚,0.9%NaCl蒸餾水,使成3%(W/V)。溶液冰箱過夜后,以玻璃組織研磨器將將其磨碎混勻,濾器除菡,抽濾后澄清液即為胎人體盤提取液。

  將上述提取液接種于肉湯培養基及髙層固體穿刺培養10天,無苗生長。并取體重18-20g小白鼠10只,一組不注射對照,另一組注入1:8稀釋的人體胎盤提取液進行安全試驗。觀察注后30min、24h、48h、72h直到10天,兩組小鼠均無異常反應。

  1.2效價測定及保存:國內外報吿效價測定方法均為將提取液稀釋成不同濃度,然后毎個濃度接種7?8個健康人,選擇皮膚反應大小正好在18-20mm之間的濃度為合適濃度(該濃度即為效價)。但此法較麻煩,不易推廣,因此我們改用72型分光光度計,雙縮尿法到水中無血色。稱重后加入倍量50C蒸餾水,在攪拌器(12000r/min)中攪拌1min,共2次,成勻漿,——20C過夜凍結。次日在40C及室溫中融解,補充50C蒸餾水,使成胎盤重量的3倍,攪拌均勻,矯正PH到6.0,置400C水浴,每小時順時鐘方向攪動1次。10h后40C冰箱過夜。取出后以2層紗布過濾,棄去沉渣,用0,1N NaOH將濾液的PH調整到6.4,冰箱過夜,次日以3000r/min離心7-8min,上清40C保存,沉淀加2倍量蒸餾水,用NaOH調PH到6.8,同上離心,棄沉渣,上清調PH到7.2,再置冰箱過夜,同上離心,將上清PH調到8.5。最后離心所得少最沉淀物與保存于冰箱內PH值6.4的上清混合在一起,測量體積,加測定O.D.來代替人休注射測效法,以不同濃度(1:4,1:6,1:8)注入健康人觀察反應,并同時測O.D.540值,發現1:6時皮膚反應大小正好為18?20mm,O.D.為0.06。

  本試驗采用取液保存方法保存效價,要達到0.05O.D.,保存4個月后的原液需1 :5稀釋,而保存7-12個月后則需1:3稀釋。

  1.3皮膚試膾方法:在患者前臂正中1/3掌側面,經75%酒精消毐后,用結核菌索注射器皮內注射人體胎盤提取液0.2ml,4h后觀察反應并記彔。

  2結果

  2.1反應安全牲 3年間共觀察各種病人及健康人455例,1例因事先沒有詳細詢問皮膚過敏史,在皮內注射劑后72h發生全身過敏,體溫輕度升高,經一般脫敏治療后即痊愈。其余454人均無任何反應。

  2.2診斷結果

  2.2.1 對照組(非腫瘤病人及健康人)共160人,其中皮膚反應最大徑超過25mm以上的有25人,陽性率為15.6%。25人中病人18人,其中7人為慢性淋巴結炎、淋巴結核,其他為慢性乳 腺增生、肝膿腫等,最長徑平均大小為28.6mm。

  2.2.2 觀察I組(未未經抗癌治療確診為惡性腫瘤者)共191人,其中包括早期癌癥128例,晚期癌癥63例。早期癌癥4 h皮膚反應超過25mm以上者共107例,陽性率達83.6%。其中早期消化道癌癥陽性率高達92.8%(52/56),其次是早期生死泌尿系統癌癥為91.3%(21/23)。晚期癌癥陽性率較低,平均陽性率僅39.7%。早晚期合計 平均陽性率為69.6%。

  2.2.3 觀察II組(經抗癌治療過的病人)共91例,平均陽性率為49.5%。

  2.2.4 觀察III組(未經治療的良性腫瘤病人)共28例,陽性8人,平均陽性率為30.7%。

  2.2.5 4組陽性率比較 經統計學檢驗(X2) ,對照組與觀察I組的陽性率有明顯差定 為腸癌。臨床雖懷疑惡性腫瘤, 但皮試陰性,用其他方法最后否定惡性腫瘤典型病例有9例。在湖北省宜昌地區五峰縣魚關鄉宮頸癌病人。其中皮試陽性的7人,可疑反應1人,陰性1人。而非癌婦女24人 中除3人可疑外,無1例陽性反應,符合率較高。

  確診為癌癥,皮試陽性病 人3例,經地賽 米松3mg脫敏,第2次皮試仍保持陽性。而在非癌病人7例皮試陽性者經脫敏試驗,其中5人轉為陰性,2人仍保持陽性,2人中1人為過敏體質。通過脫敏試驗證明胎盤皮試反應是特異的。

  關于人體胎盤提取液的保存國內尚無報道。本研究對 40C保存的及稀釋液進行了比較,結果證明稀釋后保存的人體胎盤提取液,經4個月后效果明顯下降(1:4),保存前O.D.為0.07,4個月后下降為0.03,而1:6稀釋液保存前為0.06,4月后下降為0.015。而未經稀釋的原液在40C下保存4個月,臨用時再稀釋,則效價不明顯下降。更長時間的保存效果尚待觀察。

  總之,此法簡單易行,對早期發現惡性,特別是消化道、生殖道癌癥有較高符合率。我們的研究不僅用比其他報告者多10倍 人 異(P<0.001);觀察I組與現察II組間陽性率也有明兄差異(P<0.001);對照組與觀察III組比較無明顯差異。

  3、討論

  用簡便方法進行癌癥普賢査是早期發現癌癥的重要手段,國內雖有少數單位試驗過人體胎盤提取液皮內反應,但因安全性差、測效價難、觀察例數少(幾十例〉等原因未能推廣應用。本文共觀察455例,未轉移早期癌平均陽性率達83.6%,特別是早期消化道癌及泌尿生殖系統癌,陽性率分別達91.3?92.8%。即使晚期癌癥與非腫瘤病人陽性率(15.6%)之間在統計學上也有非常顯著差異,臨床懷疑惡性腫瘤,皮試陽性,最后用病理學等方法確診的典型病例有18例,其中笫16例陳X X臨床疑似腸癌,但X光不支持,然而皮試陽性,最后用乙狀鏡確數證實這種方法的可靠性,而且進行了改進,特別對其安全性,人體胎盤血事先用放免測定乙肝抗原,同時以測光密度法代替在人體上測定效價,以及研究了保存時間及方法,這些均有利于本法進一步進行中間試驗及大面積推廣。

用簡便方法進行癌癥普賢査是早期發現癌癥的重要手段,國內雖有少數單位試驗過人體胎盤提取液皮內反應,但因安全性差、測效價難、觀察例數少(幾十例〉等原因未能推廣應用。本文共觀察455例,未轉移早期癌平均陽性率達83.6%,特別是早期消化道癌及泌尿生殖系統癌,陽性率分別達91.3?92.8%。即使晚期癌癥與非腫瘤病人陽性率(15.6%)之間在統計學上也有非常顯著差異,臨床懷疑惡性腫瘤,皮試陽性,最后用病理學等方法確診的典型病例有18例,其中笫16例陳X X臨床疑似腸癌,但X光不支持,然而皮試陽性,最后用乙狀鏡確數證實這種方法的可靠性,而且進行了改進,特別對其安全性,人體胎盤血事先用放免測定乙肝抗原,同時以測光密度法代替在人體上測定效價,以及研究了保存時間及方法,這些均有利于本法進一步進行中間試驗及大面積推廣。

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